NY∕T 2724-2015 甘蔗脱毒种苗生产技术规程(农业)
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B7A4A2DF62F74E7B96B1E11130BE5670 |
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0.3 |
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页数： |
13 |
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日期： |
2021-12-23 |
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ICS 65.020,B 16 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2724一2015,甘震脱毒种苗生产技术规程,Technique regulation for virus-free plantlet production of sugarcane,2015-05-21 发布2015-08-01 实施,中华人民共和国农业部发布,目IJ 1=1,本标准按照GB/T 1. 1←2009 给出的规则起草,本标准由中华人民共和国农业部提出并归口,本标准起草单位:浙江省农业科学院,本标准主要起草人:陈剑平、陈志、汪一婷、牟豪杰、吕永平,NY/T 2724一2015,I,NYjT 2724-2015,甘震脱毒种苗生产技术规程,1 范围,本标准规定了甘煎脱毒种茵的术语和定义、脱毒种苗生产、甘煎种苗病毒检测种类及方法、种苗包,装、运输等要求,本标准适用于甘震脱毒种苗生产,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,NY/T 1796 甘荒种苗,NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程,3 术语和定义,3. 1,3. 2,3. 3,3.4,下列术语和定义适用于本文件,甘震脱毒种苗sugarcane virus-free plantlet,经检测确定不携带指定病毒的甘荒种苗,组培瓶苗in-唔ar plantlet,生长在固体培养基(凝固剂一般为琼脂)中的组培生根苗,无琼脂苗ex-agar plantlet,从培养容器中取出并洗去表面培养基的组培生根苗,穴盘苗plug plantlet,穴盘中移栽成活的甘震组培苗,4 脱毒种苗生产流程,4. 1 无菌材料的获得,4. 1. 1 外植体材料的选择,选择具有待生产品种典型性状、无明显病虫害、品种纯正的健壮植株，切取顶芽及饱满带节间腋芽,4. 1.2 外植体处理、消毒及接种,4. 1. 2. 1 外植体处理,顶芽及带节间腋芽切成约1 cmX1 cmX1 cm 大小的块状，剥去外面2 层~3 层包被鳞(叶)片,4. 1.2.2 清洗,预处理好的外植体，用洗洁精溶液浸泡井振荡10 min~20 min ，然后在自来水下流水冲洗15 min~,20 min,4.1.2.3 z;醇溶液处理,1,NY/T 2724-2015,在准备好的超净台上，将清洗后的外植体转移到无菌锥形瓶中，倒人70%~75% 乙醇溶液没过外,植体表面1cm ，轻摇锥形瓶以除去植物材料表面气泡， 30 s~60 s 后将酒精倒去，用元菌水冲洗外植体,3 次,4. 1.2.4 次氯酸铀处理,用有效氯浓度O. 5%~ 1. 0% 的次氯酸饷珞液浸泡经乙醇将军液处理的植物材料，浸泡过程中不断轻,摇锥形瓶以除去外植体表面气泡， 10 min~ 15 min 后，倒出次氯酸饷溶液，植物材料用无菌水清洗,3 次~5 次后备用,4. 1.2.5 氯化柔处理,经70%~75% 乙醇榕液处理的植物材料也可用0.1% 氯化录榕液代替次氯酸铀洛液进行表面消,毒，浸泡时间为8 min~ 10 min ，后续清洗同次氯酸纳处理,4. 1.2.6 外植体接种,在超净工作台上取出灭过菌的接种盘，在接种盘内放置1 张~2 张无菌滤纸，用冷却、元菌的接种,器械将经过表面消毒的植物材料取出(每次取3 个~5 个) ，放在元菌滤纸上吸干材料表面水分。然后将,外植体接入外植体萌发培养基(参见附录剖， 1 瓶接种1 个外植体，封口,4. 1.3 外植体培养,接种完成后统一贴上标签，注明品种、接种日期、接种培养基等信息，放在组培用托盘内，送人培养,室进行培养，培养温度控制在(25 士3)OC ，光照强度25μmol ?m-2,?S-l ~40μmol. m→ -51 ，光照时,间每天不低于12 h ，培养期间及时去除被污染材料,4. 2 不定芽诱导和增殖,4.2. 1 不定芽诱导,由4. 1 得到的高约1. 5 cm~2. 5 cm 的无菌、成活芽萌发材料，在无菌工作台上从芽基部与母体分,离，然后接种在不定芽诱导培养基中，培养环境同4. 1. 3 0,4.2.2 不定芽增殖,由4. 2. 1 获得增殖良好的簇生甘煎培养材料，在无菌工作台上以3 个~4 个不定芽为接种单位从,基部进行分离(芽高度控制在2. 0 cm~3. 0 cm) ，然后接种在不定芽增殖培养基中，培养环境同4. 1. 3 ,每25 d~30 d 继代1 次,4. 3 茎尖培养,4. 3. 1 材料选择,选择经由4. 2. 2 连续培养获得的健壮、元菌不定芽,4.3.2 茎尖剥离,在元菌条件下，将簇生不定芽从基部单个分离，并自芽基部以上0.5 cm 左右处切断，选取芽基部分,进行茎尖剥离。在体视镜下用元菌解剖刀小心逐层剥离外层叶革肖，直至露出长约O. 3 mm~O. 5 mm 的,茎尖，然后更换为元菌且未使用过的解剖刀将茎尖从母体材料切下.立即接种于茎尖伸长培养基中,4. 3. 3 茎尖伸长培养,将4.3.2 接种好的甘庶茎尖置于(23 士3)OC ，光照强度10 /Lmol ?m-2 ?S-l ~20 /Lmol ?m-2 ?S-l ,光照时间每天不低于12 h ,4. 3. 4 不定芽诱导,茎尖伸长生长至1. 5 cm~2. 0 cm 后即可接种到不定芽诱导培养基中，培养环境同4. 1. 3 。对每一,个成活茎尖材料进行编号,4. 3. 5 再生材料增殖,将4.3.4 获得的不定芽接种到不定芽增殖培养基中，培养环境同4……
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